??產(chǎn)品基礎(chǔ)信息  

- 貨號：294-88501  

- 英文名：LBIS® Rat LH ELISA KIT (S type)  

- 中文名：大鼠促黃體生成素（LH）ELISA試劑盒（S型）

- 品牌：Wako和光純藥  

- 規(guī)格：96T

- 適用領(lǐng)域：內(nèi)分泌學(xué)、生殖醫(yī)學(xué)、藥理學(xué)研究  

- 檢測對象：大鼠血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液等生物樣本  

??產(chǎn)品詳細介紹  

1. 檢測原理與技術(shù)特點  

大鼠促黃體生成素（LH）ELISA試劑盒（S型）基于雙抗體夾心ELISA法，采用高親和力單克隆抗體特異性捕獲LH分子。樣本中的LH與預(yù)包被抗體結(jié)合后，通過標記的二抗（抗GH抗體）和鏈霉親和素-HRP酶聯(lián)顯色系統(tǒng)，生成藍色產(chǎn)物，終止反應(yīng)后通過450 nm波長測定吸光度（OD值），實現(xiàn)LH濃度的定量分析。

2. 試劑盒核心組成  

- 預(yù)包被抗體板：96孔板（8×12條），抗體包被后經(jīng)清洗處理，可直接使用。  

- 標準品：含100 ng/mL的LH標準溶液（需稀釋后使用）。  

- 緩沖液體系：包括稀釋液、測定緩沖液、洗滌液（10×濃縮液）等，均為即用型。  

- 酶標試劑：結(jié)合抗GH抗體、HRP標記鏈霉親和素。  

- 顯色與終止系統(tǒng)：TMB顯色液、1M H?SO?終止液。  

- 輔助耗材：封板膜、說明書及質(zhì)控文件。  

3. 樣本處理與檢測流程  

- 樣本要求：推薦使用EDTA抗凝血漿（避免肝素干擾），血清需靜置30分鐘后離心（2000×g，10分鐘）。  

- 稀釋方案：樣本需進行雙重稀釋（稀釋液2倍→測定緩沖液2.5倍），最終稀釋倍數(shù)不超過2.5倍，單孔樣本量10 μL。  

- 實驗步驟：  

 1. 加樣：標準品與樣本各10 μL/孔。  

 2. 孵育：37℃溫育60分鐘（一抗結(jié)合）。  

 3. 洗滌：5次洗板（350 μL/孔），去除未結(jié)合物。  

 4. 酶標抗體孵育：加入HRP標記抗體，37℃孵育60分鐘。  

 5. 顯色與終止：TMB顯色15分鐘，1M H?SO?終止反應(yīng)。  

 6. 讀板：450 nm波長測定OD值，繪制標準曲線計算濃度。  

4. 性能參數(shù)與數(shù)據(jù)驗證  

- 靈敏度：低檢測限（LOD）為0.313 ng/mL（標準曲線范圍0.313–10 ng/mL）。  

- 精密度：  

 - 板內(nèi)CV值：4.6%（均值8.40 ng/mL，SD 0.39）。  

 - 板間CV值：0.038%（均值5.00 ng/mL，SD 0.0019）。  

- 回收率：97.7%–103%（樣本添加量0.584–4.07 ng/mL）。  

- 線性范圍：稀釋線性實驗R2=0.999，支持高濃度樣本稀釋檢測。  

??核心優(yōu)勢解析  

1. 超高靈敏度與寬檢測范圍  

- 可精準檢測低至0.3 ng/mL的LH，適用于微量樣本（如幼鼠或低分泌模型）。  

- 標準曲線覆蓋0.3–10 ng/mL，滿足從基礎(chǔ)研究到臨床前藥效評估的全場景需求。  

2. 微量樣本友好設(shè)計  

- 僅需10 μL樣本即可啟動檢測，減少實驗材料消耗，尤其適合珍貴樣本或高通量篩選。  

3. 即用型試劑與操作簡化  

- 全套試劑預(yù)混即用，無需自行配制，降低操作失誤風險。  

- 全程僅需3小時50分鐘（傳統(tǒng)方法需6–8小時），顯著提升實驗效率。  

4. 高特異性與低交叉反應(yīng)  

- 采用單克隆抗體，僅識別LH的β亞基，避免與FSH、TSH等激素交叉反應(yīng)（交叉率<0.1%）。  

5. 安全環(huán)保配方  

- 采用無疊氮化物防腐劑，符合實驗室安全規(guī)范。  

?常見問題與解答  

Q1：樣本反復(fù)凍融是否影響結(jié)果？  

A：LH對反復(fù)凍融敏感，建議分裝保存（-20℃以下），避免超過3次凍融。若樣本渾濁或溶血，需重新離心處理。  

Q2：能否檢測重組LH？  

A：本試劑盒驗證過重組大鼠LH的檢測，與天然LH具有同等反應(yīng)性。  

Q3：顯色后顏色過深或過淺如何處理？  

A：- 過深：可能因樣本濃度過高，需進一步稀釋后復(fù)測。  

    - 過淺：檢查HRP酶活性（建議更換新批次試劑）或延長顯色時間至20分鐘。  

Q4：試劑盒有效期如何判斷？  

A：未開封試劑盒有效期為12個月（2–8℃保存），開封后需密封冷藏并在1個月內(nèi)用完。  

Q5：能否用于臨床診斷？  

A：本產(chǎn)品為科研用途，不可用于臨床診斷。  

Q6：如何驗證實驗數(shù)據(jù)的可靠性？  

A：建議同步進行：  

- 重復(fù)性測試：同一樣本重復(fù)3次檢測，CV值應(yīng)<10%。  

- 回收率實驗：添加已知濃度LH，回收率應(yīng)在80%–120%之間。  

Q7：與其他品牌試劑盒的差異？  

A：Wako試劑盒的樣本需求量更少（10 μL vs 常規(guī)25–50 μL），且孵育時間縮短20%，適合高通量實驗。  

Q8：運輸過程中如何避免試劑失效？  

A：建議使用泡沫箱+冰袋運輸，避免高溫（>30℃）或劇烈震動。  

Q9：能否檢測其他物種的LH？  

A：僅適用于大鼠，與其他物種（如小鼠、人）存在交叉反應(yīng)風險。  

Q10：標準曲線異常（如線性度差）怎么辦？  

A：檢查標準品是否稀釋正確，或嘗試更換不同批次標準品。若持續(xù)異常，聯(lián)系技術(shù)支持。  

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