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當前位置:首頁技術文章AssayQuant:以熒光團技術,賦能高通量篩選與機制研究

AssayQuant:以熒光團技術,賦能高通量篩選與機制研究

更新時間:2025-04-16點擊次數:1028

AssayQuant:以熒光團技術,賦能高通量篩選與機制研究

AssayQuant Technologies專注于開發激酶和磷酸酶的熒光檢測技術,致力于為生物醫藥研發提供高效、精準的解決方案。公司以PhosphoSens技術為核心,通過實時監測酶活性反應曲線,突破傳統終點法的局限性,幫助科研人員更深入地理解抑制劑作用機制。

AssayQuant的產品線覆蓋400余種激酶和磷酸酶檢測試劑盒,以及超30,000種熒光多肽底物,支持從基礎研究到藥物開發的全流程應用。其技術已在全球范圍內被132篇文獻引用,并與多家國際藥企及研究機構建立合作。

作為中國市場的戰略布局,AssayQuant自2022年起授權上海起發實驗試劑有限公司為全國一級代理商,提供本地化技術支持與服務。


核心優勢

1.PhosphoSens技術

SOX熒光團:尺寸小(與色氨酸相當)、疏水性低,可直接標記底物多肽,實現連續熒光信號輸出,避免化合物自身熒光干擾。

動態監測:每30秒至2分鐘采集數據,實時捕捉酶活性變化,支持動力學參數(如IC50、Ki、kon/koff)計算。

2.高特異性與生理相關性

底物基于天然激酶底物序列優化,確保實驗結果與體內環境高度一致,生化實驗與體內研究相關性優異。

3.多功能檢測模式

連續熒光檢測:兼容常規熒光酶標儀,無需額外設備。

時間分辨熒光(TRF):使用Eu3?替代Mg2?,通過紅移信號(620nm)消除背景干擾,適用于高靈敏度終點檢測。

4.靈活應用場景

支持抑制劑效能評估、激酶組分析、高通量篩選(HTS)、脫靶效應研究等,覆蓋腫瘤、免疫、代謝疾病等領域。


主要產品、技術介紹:

1.ALK [C1156Y](PhosphoSens Substrate: AQT0101)

AssayQuant:以熒光團技術,賦能高通量篩選與機制研究

AssayQuant 的 PhosphoSens 連續檢測技術 采用簡單的 “添加-讀取"操作流程,支持實時動力學監測,僅需通過熒光強度(FI)測量即可完成。

該技術通過測量反應初始階段(通常為前30-60分鐘)的初始線性區域斜率,提供高精度和高準確性的 初始反應速率 數據,并以每30秒至2分鐘的頻率采集大量數據點。

連續檢測格式 還可通過以下方式校正化合物自熒光干擾:

背景信號(包含化合物及反應體系中除酶外的所有組分)的熒光信號在反應過程中恒定不變;

通過從總熒光信號(包含酶及所有反應組分)中減去背景信號,即可計算每個時間點的 凈信號。

該技術兼容幾乎所有具備 動力學讀板功能 的商用熒光酶標儀及實驗室自動化設備,無需終止反應或顯色步驟,顯著縮短實驗時間并提升通量。


2.ABL1(PhosphoSens Substrate: AQT0030)

AssayQuant:以熒光團技術,賦能高通量篩選與機制研究

由于許多化合物庫含有自熒光化合物,AssayQuant 推出了 PhosphoSens Red 檢測試劑盒,該試劑盒允許在更長波長(>600 nm)下進行檢測,同時保持相同的激發波長最大值,并采用 時間分辨熒光(TRF) 技術。

我們建議在激發光與發射波長檢測之間設置 100 微秒延遲,并采用 300 微秒采集時間,以避免反應混合物中熒光材料(具有納秒級短壽命)的信號干擾。

反應完成后,向每個孔中加入基于 銪離子(Eu3+) 的試劑,該試劑會置換螯合復合物中的 Mg2+。Soc 熒光團被激發后,通過敏化作用增強銪的發光,產生最大波長為 615 nm(紅色) 的光信號,可通過標準濾光片進行測量。


3.CDC42BPG(PhosphoSens Substrate: AQT0837)


AssayQuant:以熒光團技術,賦能高通量篩選與機制研究

由于許多化合物庫含有自熒光化合物,AssayQuant開發了PhosphoSens Red檢測技術,該技術允許在更長波長(>600 nm)下進行檢測,同時保持相同的激發波長最大值,并采用時間分辨熒光(TRF)技術。

我們建議在激發光與發射波長檢測之間設置100微秒延遲,并采用300微秒采集時間,以避免反應混合物中熒光材料(具有納秒級短壽命)的信號污染。

反應完成后,向每個孔中加入基于銪離子(Eu3?)的試劑,該試劑會置換螯合復合物中的鎂離子(Mg2?)。Sox熒光團的激發會敏化銪離子的發光,產生最大波長為615 nm(紅色)的光信號,可通過標準濾光片進行測量。


目標客戶群體

生物醫藥企業:小分子激酶抑制劑研發、臨床前藥效評價。

科研機構:癌癥、免疫疾病等領域的酶學機制研究。

CRO/CDMO:高通量篩選、化合物庫活性評估。

診斷試劑開發:基于激酶活性的檢測方法學建立。


常見問題與解答

Q1:PhosphoSens技術與傳統終點法相比有何優勢?

A:傳統終點法僅能獲取單一時間點數據,而PhosphoSens通過連續監測反應曲線,可精準計算動力學參數(如IC50、Ki),并區分可逆/不可逆抑制劑。

Q2:SOX熒光團是否兼容常規熒光酶標儀?

A:是的。SOX在485nm激發/485nm發射模式下,與主流酶標儀(如FlexStation 3、SpectraMax)兼容。

Q3:如何解決化合物自身熒光干擾問題?

A:使用PhosphoSens-Red試劑盒(含Eu3?),通過時間分辨熒光(延遲100秒讀取620nm信號)有效規避干擾。

Q4:是否支持高通量篩選(HTS)?

A:支持。PhosphoSens試劑盒設計適配96孔板,可集成至自動化液體處理系統,單板通量達384孔。

Q5:能否定制特殊突變體底物?

A:可以。AssayQuant提供定制化多肽合成服務,覆蓋野生型及常見突變體(如EGFR T790M、ALK C1156Y)。

Q6:樣品處理對檢測結果影響大嗎?

A:建議使用低濃度ATP(1-2 mM)模擬生理條件,并避免反復凍融。具體方案可參考產品說明書或聯系技術支持。

Q7:試劑盒的有效期和儲存條件?

A:多數試劑盒有效期為12個月,需避光儲存于-20℃。凍干粉需復溶后48小時內使用。

Q8:如何驗證抑制劑的可逆性?

A:采用“跳躍稀釋法":在高濃度抑制劑(>IC50 25倍)中孵育酶后稀釋,可逆抑制劑活性恢復,不可逆抑制劑活性維持低位。

Q9:是否提供技術培訓與文獻支持?

A:是的。AssayQuant提供線上/線下操作培訓,并可分享同類靶點的成功案例及文獻數據。

Q10:支持哪些物種的激酶檢測?

A:目前主要覆蓋人類激酶組,部分試劑盒兼容小鼠、大鼠等模式生物,定制服務可擴展至其他物種。


熱銷產品

貨號

品名

規格

品牌

CSKS-AQT0449B

PEPTIDE SUBSTRATE

1mg

AssayQuant

AQT1000XDTT-1x0.5mL

1M DTT Solution 1 x 0.5 mL

ea

AssayQuant

AQT1000XEGTA

550 mM EGTA solution, 1 x 0.5 mL

ea

AssayQuant

AQT100XATP

100mM ATP (100X), 1 x 0.5 mL

ea

AssayQuant

AQT10XKRB

Reaction Buffer (RB), 10X, No DTTor EGTA

1.5 mL

AssayQuant

AQT10XKRB-1x20mL

10X Kinase Reaction Buffer - No DTT, No EGTA, 1 x 20 mL

ea

AssayQuant

AQT1XKDB

Enzyme Dilution Buffer (EDB), 1X, No DTT or EGTA

1.5 mL

AssayQuant

AQT1XKDB-1x20mL

1X Kinase Dilution Buffer, No DTT, No EGTA, 1 x 20 mL

ea

AssayQuant

CSKS-AQT0001

PhosphoSensKit

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0032B

BULK - Cysteine Sox Kinase Sensor AQT0032, 1 mg net peptide, lyophilized

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0101

PhosphoSens Kit

1mg

AssayQuant

CSKSAQT0101B

BULK - Cysteine Sox Kinase Sensor AQT0101, Peptide Substrate, 1mg net peptide, lyophilized (Lot 011-02V1)

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0101B

PEPTIDE SUBSTRATE

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0101B- 1 x 1 mg net peptide, lyophilized.

BULK - Cysteine Sox Kinase Sensor AQT0101, 1 x 1 mg net peptide, lyophilized.

ea

AssayQuant

CSKS-AQT0101K

Cysteine Sox Kinase Sensor AqT0101

96 assays

AssayQuant

CSKS-AQT0104B

PEPTIDE SUBSTRATE

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0157B

PEPTIDE SUBSTRATE

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0186B

PEPTIDE SUBSTRATE

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0231

Ser/Thr Kinase Peptide substrate

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0231B

PhosphoSens substrate

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0231k

Ser/Thr Kinase Assay KIT PRKACG (PKACG, PKACg); ROCK1; ROCK2; RPS6KB1 (p70S6K); RPS6KB2(P70S6KB)

96t

AssayQuant

CSKS-AQT0235B

DDR2 peptide

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0255B

BULK Cysteine Sox Kinase Sensor, AQT0255, Peptide substrate, 1mg net lyophilized

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0258

PhosphoSensKit

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0258B

PEPTIDE SUBSTRATE

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0280B

DDR1 peptide

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0296B

PEPTIDE SUBSTRATE

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0297

PhosphoSensKit

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0297B

PEPTIDE SUBSTRATE

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0414

PEPTIDE SUBSTRATE

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0426

Ser/Thr Kinase Peptide substrate

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0459B

BULK Cysteine Sox Kinase Sensor, AQT0459 , Peptide substrate, 1mg net lyophilized

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0490B

PEPTIDE SUBSTRATE

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0505B

Peptide substrate

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0505K

KIT-Cysteine Sox Kinase Sensor

96T

AssayQuant

CSKS-AQT0515

Cysteine Sox Kinase Sensor

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0535

Ser/Thr Kinase Peptide substrate

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0536B

PEPTIDE SUBSTRATE

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0537B

PhosphoSens substrate

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0653B

Bulk Sensor Peptide (PN:CSKS-AQT0653B)

1 mg

AssayQuant

CSKS-AQT0653KR

Red-Shift Evaluation Kits (PN:CSKS-AQT0653KR)

Kits

AssayQuant

CSKS-AQT0663B

Cysteine Sox Kinase Sensor AQT0663, 1 x 1 mg net peptide, lyophilized.

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0663K

KIT - Cysteine Sox Kinase Sensor, AQT0663, 96 assays, liquid

kit

AssayQuant

CSKS-AQT0688B

Peptide substrate

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0691B

Peptide substrate

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0693B

PhosphoSens Kinase Sensor Peptide

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0730

Ser/Thr Kinase Peptide substrate

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0732B

PEPTIDE SUBSTRATE

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0733B

PEPTIDE SUBSTRATE

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0734

BULK Cysteine Sox Kinase Sensor, AQT0734 , Peptide substrate, 1mg net lyophilized

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0742

Ser/Thr Kinase Peptide substrate

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0759B

PEPTIDE SUBSTRATE

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0766B

PEPTIDE SUBSTRATE

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0803

PEPTIDE SUBSTRATE

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0839B

PhosphoSens substrate

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0887B

BULK - Cysteine Sox Kinase Sensor, AQT0887, 1 mg net peptide, lyophilized

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0991B

Cysteine Sox Kinase Sensor AQT0991, peptide substrate, 1mg net peptide, lyophilized

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT1030B

PEPTIDE SUBSTRATE

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT50

50mM(50*)Europium

15ml

AssayQuant

CSPS-AQT0737B

PEPTIDE SUBSTRATE

1mg

AssayQuant

Sample

Ammonium bicarb solution for peptide solubilization

1.0 mL

AssayQuant

如對該品牌產品感興趣,歡迎咨詢授權代理商:上海起發!


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