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技術文章

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當前位置:首頁技術文章AptaFluor®SAH甲基轉移酶測定

AptaFluor®SAH甲基轉移酶測定

更新時間:2020-12-29點擊次數:2361

 

 

 

HMT的同質通用酶甲基轉移酶測定

AptaFluor –利用適體的力量進行藥物發現

表觀遺傳調控已被證明是多種疾病的成因。甲基轉移酶抑制劑的發現目前是一個活躍的領域。甲基轉移酶使用S-腺苷甲硫氨酸(SAM)作為甲基供體甲基化各種底物,剩下的常見產物S-腺苷同型半胱氨酸(SAH)。

AptaFluor SAH甲基轉移酶測定法使用天然存在的適體或核糖開關,可選擇性地與SAH(甲基轉移酶反應的不變產物)結合。核糖開關的*親和力和選擇性與陽性TR-FRET信號相結合,能夠以的靈敏度篩選和分析甲基轉移酶。

通過直接檢測均質形式的SAH,實際上可以使用任何甲基轉移酶進行篩選和酶研究。該分析可用作協助研究人員進行命中鑒定和鑒定的工具,以尋求開發新的甲基轉移酶抑制劑作為疾病的治療方法。

通過TR-FRET讀數直接檢測SAH

 

超敏感

敏感的HTS甲基轉移酶測定法的LLD為0.6 nM SAH。這大大減少了酶的使用,并允許在 SAM的K m或以下進行分析。

 

比較此海報中不同方法的測定靈敏度

生理SAM和AptaFluor分析法靈敏檢測PRMT4

穩定

出色的試劑和信號穩定性降低了測定的可變性,并實現了自動化的工作流程。

 
 

強大的

在各種測定條件下均具有出色的Z'值。

 

具有0.2 uM或2 uM SAM和組蛋白底物的PRMT4酶為陽性對照。PRMT4和組蛋白底物作為陰性對照。

簡單的混合閱讀

AptaFluor是一種簡單的混合和讀取格式。運行您的酶反應,添加淬滅試劑,添加AptaFluor試劑,并閱讀板。

 

與多種MTase受體底物兼容

 

MT受體底物的耐受性。在存在核小體(10 ng /μL),組蛋白H3-3(3 ng /μL),組蛋白H3(1-21)肽(10μM)和Poly d(IC)的情況下建立100 nM SAH-SAM標準曲線)(2.5毫安/微升); 控制孔缺少MT底物。

通用測定法–與幾乎所有甲基轉移酶一起使用

 
甲基轉移酶和底物圖
 

AptaFluor SAH甲基轉移酶測定– TR-FRET(PDF)

在主要的多模式閱讀器上驗證的遠紅色TR-FRET讀數

供應商儀器
bioteklogoTriStar²SLB 942
密特拉拉斯LB 943
 
bioteklogoCytation™5
Cytation™3
Cytation™1
Synergy™H1
Synergy™2 / H4 / 4
Synergy™HTX
Synergy™Neo 2
 
BMGLABTECH徽標POLARstar ®歐米茄
FLUOSTAR ®歐米茄
PHERAstar ® FSX
PHERAstar ®加/ FS
CLARIOstar ® /加
 
MDS AT徽標分析師® GT / HT
雙子座® XPS / EM
的SpectraMax ® M2 / M2e的
的SpectraMax ® M5 /的M5e / FlexStation ® 3
的SpectraMax ®范式
 
珀金埃爾默標志的EnVision ® /的EnVision ® XCITE
 
tecanLogo無限® M1000 / M1000Pro / Safire2™
無限® M200
無限® F500
無限® F200 /超進化
Spark™10M

AptaFluor SAH甲基轉移酶檢測試劑盒

*對于定制或批量訂單(超過10,000口井),請聯系我們([email protected])以獲得報價。

 

貨號。產品描述價錢
3023-BAptaFluor SAH甲基轉移酶測定(100個測定,96孔)$ 375.00
3023-1KAptaFluor SAH甲基轉移酶測定法(1,000測定法,384孔)$ 1,175.00
3023-10KAptaFluor SAH甲基轉移酶測定(10,000測定,384孔)$ 6,999.00

 

TR-FRET檢測板

編輯
貓。沒有。產品描述價錢 
2234康寧96孔白色檢測板(#3642),3包(200多種檢測)$ 40.00添加到購物車
2231康寧384孔白色檢測板(#4513),3包(1,000多種檢測)$ 50.00添加到購物車
2232康寧384孔白色檢測板(#4513),30包(10,000+檢測)$ 450.00添加到購物車
 

使用生化分析進行篩選后導航命中優先級的指南

這樣就完成了屏幕顯示。下一步是什么?本指南的重點是在使用酶標靶進行初次篩選后,無論使用高通量篩選(HTS)還是虛擬篩選(VS),如何使用生化分析來表征化合物并確定其優先級。下面顯示了一個典型的篩選漏斗,突出了生化活性測定法的許多應用。

在這里,我們討論選擇潛在客戶的策略,包括:

  • 分析注意事項
  • 命中確認
  • 運行劑量響應
  • 復合分類
  • 命中擴展
  • 行動研究機制
  • 停留時間測量

 

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