NEW! CHOgro® High Yield Expression System

The most advanced system for transient transfection and protein production in suspension CHO cells

新！CHOgro®高產(chǎn)量表達(dá)系統(tǒng)

mirusbio用于懸浮CHO細(xì)胞中瞬時(shí)轉(zhuǎn)染和蛋白質(zhì)生產(chǎn)的先進(jìn)系統(tǒng)

選擇產(chǎn)品：

CHOgro®高產(chǎn)量表達(dá)系統(tǒng)
（試劑盒包括：CHOgro®表達(dá)培養(yǎng)基（2 x 1 L），CHOgro®復(fù)合物形成溶液（100 ml），L-谷氨酰胺（100 ml），泊洛沙姆188溶液（100 ml），Trans IT- PRO®轉(zhuǎn)染試劑（1毫升），CHOgro®滴度增強(qiáng)劑（20毫升））CHOgro®轉(zhuǎn)染和滴度增強(qiáng)試劑盒
（試劑盒包括：反式 IT-PRO®轉(zhuǎn)染試劑（1ml）中，CHOgro®滴度增強(qiáng)（20毫升））CHOgro®表達(dá)培養(yǎng)基CHOgro®復(fù)合物形成解決方案泊洛沙姆188溶液，10％L-谷氨酰胺溶液，200 mM跨 IT-PRO®轉(zhuǎn)染試劑

選擇尺寸：

先生62701套

選擇的目錄號(hào)：MIR 6270

NEW CHOgro®高產(chǎn)表達(dá)系統(tǒng)對(duì)于高產(chǎn)量的蛋白質(zhì)生產(chǎn)中懸浮的CHO細(xì)胞上的和具有成本效益的瞬時(shí)轉(zhuǎn)染系統(tǒng)。我們的第二代系統(tǒng)具有CHOgro®滴度增強(qiáng)劑，可提供業(yè)界的快速蛋白質(zhì)產(chǎn)量。

• 高產(chǎn)量 -在7天內(nèi)達(dá)到更高的抗體滴度-比ExpiCHO表達(dá)系統(tǒng)更快
• 簡(jiǎn)單的工作流程 -當(dāng)天轉(zhuǎn)染，增強(qiáng)子添加和溫度變化
• 無憂 -無需商業(yè)許可證；無動(dòng)物源

數(shù)字和數(shù)據(jù)

使用多種抗體構(gòu)建體的CHOgro®高產(chǎn)量表達(dá)系統(tǒng)優(yōu)于ExpiCHO表達(dá)系統(tǒng)。 六個(gè)不同的IgG1抗體構(gòu)建體，包括在相同的載體骨架合成的5個(gè)治療相關(guān)的構(gòu)建體通過使用瞬時(shí)轉(zhuǎn)染產(chǎn)生的反式 1試劑對(duì)DNA比率（體積：IT-PRO®轉(zhuǎn)染試劑（Mirus公司Bio公司）以1： wt和1 µg質(zhì)粒DNA每毫升培養(yǎng)在CHOgro®表達(dá)培養(yǎng)基（Mirus Bio）中的FreeStyle™CHO-S細(xì)胞（ThermoFisher Scientific）中，細(xì)胞密度為4 x 10 ⁶細(xì)胞/ ml，或Expifectamine CHO轉(zhuǎn)染試劑盒（ThermoFisher Scientific），在ExpiCHO-S細(xì)胞（ThermoFisher Scientific）中每毫升培養(yǎng)物每毫升培養(yǎng)液的DNA含量為3.2：1試劑對(duì)DNA（vol：wt）和1 µg質(zhì)粒DNA表達(dá)培養(yǎng)基（ThermoFisher Scientific），細(xì)胞密度為6 x 10 ⁶細(xì)胞/毫升 在轉(zhuǎn)染時(shí)，將所有細(xì)胞分成125ml的生長(zhǎng)燒瓶（25ml /瓶，Thomson Instrument Company）。添加轉(zhuǎn)染復(fù)合物后立即添加CHOgro®滴度增強(qiáng)劑，并將培養(yǎng)物在32°C搖動(dòng)下孵育，直至收獲CHOgro®高產(chǎn)量表達(dá)系統(tǒng)。ExpiCHO表達(dá)系統(tǒng)（ThermoFisher Scientific）遵循大滴度規(guī)程：轉(zhuǎn)染后24小時(shí)加入Expifectamine CHO增強(qiáng)劑和飼料（ThermoFisher Scientific），并將培養(yǎng)物移至32°C。在第5天，將第二體積的ExpiCHO進(jìn)料（ThermoFisher Scientific）添加到燒瓶中。使用標(biāo)準(zhǔn)夾心人IgG ELISA分析第7天和第14天的上清液。誤差棒代表一式三份技術(shù)重復(fù)的標(biāo)準(zhǔn)偏差。

在CHOgro®表達(dá)培養(yǎng)基中生長(zhǎng)的FreeStyle™CHO-S和ExpiCHO細(xì)胞產(chǎn)生相似的滴度。

在CHOgro®表達(dá)培養(yǎng)基（Mirus Bio）中培養(yǎng)FreeStyle™CHO-S細(xì)胞（ThermoFisher Scientific）或ExpiCHO-S細(xì)胞（ThermoFisher Scientific）。兩種細(xì)胞系中瞬時(shí)與編碼人IgG1內(nèi)部對(duì)照抗體的質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染的，貝伐單抗或使用Fc融合構(gòu)建體反式 IT-PRO®轉(zhuǎn)染試劑（Mirus公司Bio公司）以1：1的試劑對(duì)DNA比率（體積：在未經(jīng)處理的6孔板中，每毫升培養(yǎng)液含有1 wt g DNA和1 µg質(zhì)粒DNA。將所有培養(yǎng)物移至32°C，搖動(dòng)，然后將轉(zhuǎn)染復(fù)合物和CHOgro®Titer Enhancer添加到培養(yǎng)物中。使用標(biāo)準(zhǔn)夾心人IgG ELISA分析第14天的上清液。誤差棒代表一式三份技術(shù)重復(fù)的標(biāo)準(zhǔn)偏差。

CHOgro®滴度增強(qiáng)劑不會(huì)對(duì)轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞生長(zhǎng)和活力產(chǎn)生不利影響。FreeStyle™CHO-S細(xì)胞的一式三份培養(yǎng)瓶適于CHOgro®表達(dá)培養(yǎng)基與瞬時(shí)轉(zhuǎn)染跨 IT-PRO®轉(zhuǎn)染試劑（Mirus公司Bio公司）以1：1的試劑對(duì)DNA比率（體積：重量）和1μg每毫升培養(yǎng)物的質(zhì)粒DNA為4 x 10 ⁶在125毫升Optimum Growth燒瓶（25毫升/瓶，湯姆森儀器公司）中的細(xì)胞數(shù)/毫升。如所示，添加了CHOgro®Titer Enhancer，并且在將轉(zhuǎn)染復(fù)合物添加到培養(yǎng)液后立即將所有培養(yǎng)液轉(zhuǎn)移至32°C。轉(zhuǎn)染后每天使用Guava®easyCyte™5HT流式細(xì)胞儀（EMD Millipore）測(cè)量細(xì)胞計(jì)數(shù)（實(shí)線）和生存力（碘化丙啶染色，虛線）。

CHOgro®高產(chǎn)量表達(dá)系統(tǒng)可擴(kuò)展1000倍。 人IgG1是通過用瞬時(shí)轉(zhuǎn)染產(chǎn)生的  反式 1試劑：DNA比IT-PRO®轉(zhuǎn)染試劑（Mirus公司Bio制）和每毫升培養(yǎng)液1微克質(zhì)粒DNA在1。Freestyle CHO細(xì)胞（Thermo Fisher Scientific）以4 x 10 ⁶的密度轉(zhuǎn)染 在以下體積/培養(yǎng)容器中的CHOgro®表達(dá)培養(yǎng)基（Mirus Bio）中的細(xì)胞數(shù)/ ml：2 ml /非組織培養(yǎng)物處理過的6孔培養(yǎng)皿，20 ml / 125 ml Thomson燒瓶，500 ml / 1.6 L Thomson燒瓶，2000 ml / 5 L湯姆森燒瓶。將所有培養(yǎng)物移至32°C，搖動(dòng)，然后將轉(zhuǎn)染復(fù)合物和CHOgro®Titer Enhancer添加到培養(yǎng)物中。在其余的實(shí)驗(yàn)中，將培養(yǎng)物保持在適當(dāng)?shù)膿u動(dòng)速度下。使用標(biāo)準(zhǔn)夾心人IgG ELISA分析第14天的上清液。誤差棒代表一式三份技術(shù)重復(fù)的標(biāo)準(zhǔn)偏差。

使用多個(gè)Fc融合構(gòu)建體觀察到效價(jià)增強(qiáng)。使用兩種不同的Fc融合構(gòu)建體瞬時(shí)轉(zhuǎn)染跨每毫升培養(yǎng)液：（重量體積）和1μg的質(zhì)粒DNA試劑1到DNA比：以1 IT-PRO®轉(zhuǎn)染試劑（Mirus公司Bio公司）。將FreeStyle™CHO-S（ThermoFisher Scientific）細(xì)胞培養(yǎng)在CHOgro®表達(dá)培養(yǎng)基（Mirus Bio）中，并以4 x 10 ⁶接種在未處理的6孔板中轉(zhuǎn)染時(shí)的細(xì)胞數(shù)/ ml（2 ml /孔）。如所指示的，添加了CHOgro®滴度增強(qiáng)劑，并且在將轉(zhuǎn)染復(fù)合物添加至培養(yǎng)物后立即將培養(yǎng)物轉(zhuǎn)移至32℃。使用標(biāo)準(zhǔn)的夾心人IgG ELISA分析第10天的上清液。誤差棒代表一式三份技術(shù)重復(fù)的標(biāo)準(zhǔn)偏差。

第三方使用CHOgro®高產(chǎn)量表達(dá)系統(tǒng)和CHOgro®滴度增強(qiáng)劑實(shí)現(xiàn)的更高滴度。Fc融合蛋白通過在完整CHOgro®媒體CHO-S細(xì)胞的瞬時(shí)轉(zhuǎn)染產(chǎn)生的使用反式（1:1試劑：DNA比率，體積：重量1）IT-PRO®轉(zhuǎn)染試劑。用于轉(zhuǎn)染的細(xì)胞為2 x 10 ⁶細(xì)胞/ ml（無CHOgro®Titer Enhancer）或4 x 10 ⁶（含CHOgro®Titer Enhancer）。轉(zhuǎn)染后24小時(shí)（無CHOgro®滴度增強(qiáng)劑）或立即（有CHOgro®滴度增強(qiáng)劑）將培養(yǎng)物轉(zhuǎn)移至32°C。產(chǎn)量代表轉(zhuǎn)染后第11天收獲的0.5 L培養(yǎng)物中的終親和純化蛋白。

反式 IT-PRO®+CHOgro®滴度增強(qiáng)性能優(yōu)于PEImax和線性25kDa的PEI轉(zhuǎn)染試劑。 的IgG1抗體構(gòu)建體通過使用瞬時(shí)轉(zhuǎn)染產(chǎn)生的反式 1試劑對(duì)DNA比率（體積：重量），PEImax（4：1，Polysciences公司），或IT-PRO®轉(zhuǎn)染試劑（Mirus公司Bio公司）以1在CHOgro®表達(dá)培養(yǎng)基（Mirus Bio）中以4 x 10 ⁶的細(xì)胞密度培養(yǎng)的FreeStyle™CHO-S細(xì)胞（ThermoFisher Scientific）中每毫升培養(yǎng)液中線性25 kDa PEI（6：1，Polysciences）和1 µg質(zhì)粒DNA細(xì)胞/毫升 添加轉(zhuǎn)染復(fù)合物后立即添加滴定增強(qiáng)劑（CHORUS®Titer Enhancer）（Mirus Bio），將培養(yǎng)物在32°C振搖下孵育，直至收獲所有試劑。使用標(biāo)準(zhǔn)夾心人IgG ELISA分析第14天的上清液。誤差棒代表一式三份技術(shù)重復(fù)的標(biāo)準(zhǔn)偏差。

資源資源

技術(shù)指標(biāo)

儲(chǔ)存條件：
所有配置：多種儲(chǔ)存條件-有關(guān)具體建議，請(qǐng)參見各個(gè)瓶子。

產(chǎn)品保證：
所有配置：如產(chǎn)品組件上的標(biāo)簽所示
 

技術(shù)產(chǎn)品文獻(xiàn)

完整協(xié)議

CHOgro®高產(chǎn)量表達(dá)系統(tǒng)完整方案（PDF）

快速參考協(xié)議

CHOgro®復(fù)合物形成溶液QRP （PDF）
CHOgro®表達(dá)培養(yǎng)基QRP （PDF）
CHOgro®轉(zhuǎn)染和滴度增強(qiáng)試劑盒QRP （PDF）

產(chǎn)品數(shù)據(jù)表

L-谷氨酰胺產(chǎn)品數(shù)據(jù)表（PDF）
泊洛沙姆188產(chǎn)品數(shù)據(jù)表（PDF）

安全數(shù)據(jù)表

CHOgro®表達(dá)培養(yǎng)基SDS （PDF）
CHOgro®高產(chǎn)表達(dá)系統(tǒng)SDS （PDF）
CHOgro®轉(zhuǎn)染和滴度增強(qiáng)套件SDS （PDF）
L-谷氨酰胺的解決方案SDS （PDF）
泊洛沙姆188溶液SDS （PDF）
跨 IT-PRO®轉(zhuǎn)染試劑SDS （PDF）