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當前位置:首頁技術文章Hyperphage 超噬菌體 說明書

Hyperphage 超噬菌體 說明書

更新時間:2017-08-16點擊次數:3477

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Hyperphage

 

超噬菌體 - 噬菌體展示中具有改善的平移效率的輔助噬菌體

一種用于從巨噬細胞填充的庫中分離重組抗體,蛋白質或肽的有效工具。

介紹

Rondot等人開發了一種輔助噬菌體技術(“Hyperphage System”)。(Nature Biotechnology 19:75-81,2001)。Hyperphage系統允許通過增加每個噬菌體顆粒顯示的抗體數量(高達5對0.01),從而在功能基因分析和蛋白質組學領域提供了很大的優勢,從而改善噬菌體展示中的抗體呈遞。噬菌體的淘選可以用少量的抗原進行,效率更高。例如,通過在2維凝膠電泳之后,通過使用超噬菌體包裝的文庫對蛋白質斑點的印跡進行淘選,可以改進用于抗體分離的通用文庫的應用。

更多應用

可以通過淘選合成的膜結合肽表位來分析大量的開放閱讀框(ORF)。在癌癥研究中,超噬菌體文庫可能是通過淘洗細胞表面發現新的腫瘤標志物的工具。

超噬菌體系

hyperphages在pIII基因中攜帶缺失。它們由產生功能性pIII的大腸桿菌包裝細胞系產生,其用于用pIII缺失包裝噬菌體基因組。所得的超噬菌體在其表面攜帶功能性pIII,但在其基因組中缺少pIII基因。然后可以使用這些超噬菌粒用噬菌粒文庫感染細菌。每個所得的顯示噬菌體在其表面上攜帶抗體或肽的幾個拷貝,因此顯著提高了平移效率。

使用pSEX噬菌粒抗體基因文庫的例子

抗原結合通過使用超噬菌素增強了兩個以上的數量級。此外,由于攜帶載體的質粒(噬菌粒)編碼pIII和scFv片段之間的蛋白酶切割位點,所以可以通過蛋白酶處理洗脫超噬菌體填充的文庫,從而洗脫zui高親和力的結合物,加上恢復野生型感染性表型以優化恢復感興趣的抗體基因。

優點

  • 提高淘選效率
  • 允許用減少量的淘選抗原進行淘選
  • 識別高親和性親和性粘合劑

 

參考

協議

  • Hust M.,Frenzel,A.,Tomszak,F,Kügler,J&Dübel,S。(2014)Antibody Phage Display。在:Dübel,S.&Reichert,JM(eds。)Handbook of Therapeutic Antibodies,2nd ed。Wiley-VCH,Weinheim,ISBN 978-3-527-32937-3 p。43-76
  • Hust,M.,Frenzel,A.,Schirmann,T。和Dübel,S。(2014)從抗體基因文庫中選擇重組抗體。方法Mol Biol。1101,305-320.2
  • Hust,M.,Frenzel,A.,Meyer,T.,Schirmann,T。和Dübel,S。(2012)。人類天真抗體基因文庫的構建。In:Antibody Engineering:Methods and Protocols,Ed:Chames,P.,Meth Mol Biol 907,85-107
  • Breitling,F.,Broders,O.,Helmsing,S.,Hust,M&Dübel,S(2010)Improving phage display throughput by using Hyperphage,miniaturized titration and pVIII(g8p)ELISA。In:Antibody Engineering(2nd ed)Springer Protocols。卷。1,ISBN 978-3-642-01143-6,p。197-206
  • Broders,O.,Breitling,F.和Dübel,S。(2003)。超噬菌體 - 改進噬菌體展示中的抗體表達。Methods Mol Biol 205,295-302。

噬菌體展示

噬菌體展示

用于產生重組抗體,蛋白質或肽的抗體超噬菌體展示技術 - 功能基因分析的跨越式發展

 

部分產品信息如下:

anti-M13/fd/F1 Filamentous Phages mouse monoclonal, B62-FE2, Biotin Conjugate

The antibody binds to pVIII major coat protein of filamentous phages of the fd, F1 and M13 group. Suitable for the identification of recombinant phages in antigen and antibody-phage systems and phage ELISA. 

61597

Quantity

250 µL (100 µg/mL)

Delivery time

usually 1-7 working days

Application

ELISA, Phage Display, WB

Reactivity

filamentous phages F1, filamentous phages fd, filamentous phages M13

 

anti-M13/fd/F1 Filamentous Phages mouse monoclonal, B62-FE2, FITC Conjugate

The antibody binds to pVIII major coat protein of filamentous phages of the fd, F1 and M13 group. Suitable for the identification of recombinant phages in antigen and antibody-phage display systems and phage ELISA. 

Cat. No.

61497

Quantity

250 µL

Delivery time

usually 1-7 working days

Application

Phage Display

Reactivity

filamentous phages F1, filamentous phages fd, filamentous phages M13

 

anti-M13/fd/F1 Filamentous Phages mouse monoclonal, B62-FE2, lyophilized, purified, 100 µg

The antibody binds to pVIII major coat protein of filamentous phages of the fd, F1 and M13 group. Suitable for the identification of recombinant phages in antigen and antibody-phage display systems and phage ELISA. 

Product informations:

Cat. No.

61097

Quantity

100 µg

Delivery time

usually 1-7 working days

Application

ELISA, IEM, Phage Display, WB

Reactivity

filamentous phages F1, filamentous phages fd, filamentous phages M13

 

anti-M13/fd/F1 Filamentous Phages mouse monoclonal, B62-FE2, lyophilized, purified, 50 µg

The antibody binds to pVIII major coat protein of filamentous phages of the fd, F1 and M13 group. Suitable for the identification of recombinant phages in antigen and antibody-phage display systems and phage ELISA. 

Product informations:

Cat. No.

61997

Quantity

50 µg

Delivery time

usually 1-7 working days

Application

ELISA, IEM, Phage Display, WB

Reactivity

filamentous phages F1, filamentous phages fd, filamentous phages M13

 

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